国产a网-国产a视频精品免费观看-国产a区-国产a免费观看-天天狠天天操-天天好比网

網(wǎng)站導(dǎo)航

技術(shù)文章

當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > 凝膠電泳常見問題分析
凝膠電泳常見問題分析
更新時間:2015-04-23 點(diǎn)擊次數(shù):2026

要跑瓊脂糖凝膠電泳, 5ng 就能很清楚的跑出來是這樣嗎?能夠照相的清楚的條帶,至少需要多少量呢?
參考見解:5ng 已經(jīng)可以了,但是或許20ng50ng-200ng效果好,在此范圍內(nèi)呈線性。

把210bp的pcr產(chǎn)物進(jìn)行酶切,得到190+20bp的兩個片段,請問能用瓊脂糖凝膠電泳檢測酶切結(jié)果嗎?用多大濃度的膠和多大的電壓呢?
參考見解:可以用瓊脂糖凝膠電泳分開,電壓不變,可用1.5%到2%的膠,20bp得片斷不一定能看得到,所以應(yīng)用未酶切的PCR片斷作對照.


瓊脂糖濃度(W/V)



大小范圍(bp)



0.6%



1000-23000



0.8%



800-10000



1.0%



400-8000



1.2%



300-7000



1.5%



200-4000



2%



100-3000



丙烯酰胺凝膠電泳更適合于分離純化小分子量核酸(5-500bp)并且分辨率高,可以達(dá)到1個bp。所以建議進(jìn)行丙烯酰胺凝膠電泳試試。

Marker做瓊脂糖凝膠電泳,發(fā)現(xiàn)Marker在加樣孔有一個明顯的亮帶,什么原因?
參考見解:marker有時會出現(xiàn)這樣的問題,應(yīng)該是時間久了。新買時跑膠在點(diǎn)樣孔沒有,過一段時間就會在點(diǎn)樣孔出現(xiàn)亮點(diǎn)。也可能是蛋白,有時DNA提的不純含有蛋白時就會出現(xiàn)上樣孔有條帶的現(xiàn)象。

瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA時,跑出的帶后面出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象,什么原因造成的?
參考見解: DNA帶模糊??:
1、 DNA降解??避免核酸酶污染。
2、 DNA上樣量過多??減少凝膠中DNA上樣量。
3、 所用電泳條件不合適??電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度<30℃,巨大DNA鏈,溫度應(yīng)<15℃,核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力。
4、 DNA樣含鹽過高??電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽。
5、 有蛋白污染??電泳前酚抽提去除蛋白。
6、 DNA變性,?電泳前勿加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA。

將從組織提取的DNA進(jìn)瓊行脂糖凝膠電泳,用的1.5%的膠加了EB,80V跑1小時,溴酚藍(lán)已經(jīng)跑到頭了,在紫外燈觀察什么帶也沒有,只見孔里面有橘紅色的亮光。好象沒跑出來,是怎么回事?

參考見解:
1、 根據(jù)目的條帶長度來調(diào)整凝膠濃度,一般1.5%左右,也不一定。
2、 紫外燈下沒見帶,不一定沒有出孔,而是量少看不到,可以測一下濃度看一下,或直接試跑一下PCR。
3、 加一個marker孔,尤其你*次跑膠時。
4、 電泳時間可能過長,一般75v×30min左右,但是具體看溴酚藍(lán)的離孔距離和目的條帶離孔距離。

聯(lián)系方式

郵件:sh-jiapeng@163.com
傳真:021-36162369
郵編:200444
地址:上海市真陳路1398弄15號
在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

021-66030766

掃一掃,關(guān)注我們

主站蜘蛛池模板: 高清国产美女一级a毛片| 在线免费国产视频| 91精品日本久久久久久牛牛| 欧美影院在线| 欧美一区二区日韩一区二区| 亚洲欧美一区二区三区九九九| 95香蕉视频| 欧美日韩福利视频| 免费一级a毛片在线播| 交欧美| 国产精品久久久久久久| 日韩视频高清| 日本啊v| 久久伊人精品一区二区三区 | 亚洲区中文字幕| 一区二区日韩| 国产精品久久久久久久久鸭| 欧洲97色综合成人网| 日韩中文字幕免费版| 97一区二区三区四区久久| 久久er99| 国产精品久久精品| 欧美激情首页| 国产精品免费观看| 亚洲欧美一区二区三区孕妇| av毛片免费看| 国产精品hd免费观看| 久久久久久久国产精品毛片| 久久精品一区| 国产精品久久久久久久久鸭| 日韩中文欧美| 亚洲欧洲免费| 国产免费网址| 国产成人在线观看免费网站| 欧美在线观看一区二区三区| 欧美在线xx| 国产边打电话边做对白刺激| 精品国产一区二区三区久久久狼| 国产第二十页| 99精品国产成人一区二区| 免费国产成人α片|